毛細管電泳的使用方法介紹

　　毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場(chǎng)為驅動(dòng)力，依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現分離的電泳分離分析方法。

　　毛細管電泳的使用方法介紹：

　?。?）按照儀器操作手冊開(kāi)機，預熱、輸入各項參數，如毛細管溫度、操作電壓、檢測波長(cháng)和沖洗程序等。操作緩沖液需過(guò)濾和脫氣。沖洗液、緩沖液等放置于樣品瓶中，依次放入進(jìn)樣器。

　?。?）毛細管處理的好壞，對測定結果影響很大。未涂層新毛細管要用較濃堿液在較高溫度（例如用1mol/L氫氧化鈉溶液在60℃）沖洗，使毛細管內壁生成硅羥基，再依次用0.1mol/L氫氧化鈉溶液、水和操作緩沖液各沖洗數分鐘。兩次進(jìn)樣中間可僅用緩沖液沖洗，但若發(fā)現分離性能改變，則開(kāi)始須用0.1mol/L氫氧化鈉溶液沖洗，甚至要用濃氫氧化鈉溶液升溫沖洗。凝膠毛細管、涂層毛細管、填充毛細管的沖洗則應按照所附說(shuō)明書(shū)操作。沖洗時(shí)將盛溶液的試樣瓶依次置于進(jìn)樣器，設定順序和時(shí)間進(jìn)行。

　?。?）操作緩沖液的種類(lèi)、pH值和濃度，以及添加劑［用以增加溶質(zhì)的溶解度和（或）控制溶質(zhì)的解離度，手性拆分等］的選定對測定結果的影響也很大，應照各品種項下的規定配制，根據初試的結果調整、優(yōu)化。

　?。?）將待測供試品溶液瓶置于進(jìn)樣器中，設定操作參數，如進(jìn)樣壓力（電動(dòng)進(jìn)樣電壓）、進(jìn)樣時(shí)間、正極或負極進(jìn)樣、操作電壓或電流、檢測器參數等，開(kāi)始測試。根據初試的電泳譜圖調整儀器參數和操作緩沖液，以獲得優(yōu)化結果。而后用優(yōu)化條件正式測試。

　?。?）測試完畢后用水沖洗毛細管，注意將毛細管兩端浸入水中保存，如果長(cháng)久不用應將毛細管用氮吹干，最后關(guān)機。

　?。?）定量測定以采用內標法為宜。用加壓或減壓法進(jìn)樣時(shí)，供試品溶液黏度會(huì )影響進(jìn)樣體積，應注意保持試樣溶液和對照溶液黏度一致；用電動(dòng)法進(jìn)樣時(shí)，被測組分因電歧視現象和溶液離子強度會(huì )影響待測組分的遷移量，也要注意其影響。